内参抗体可用于评价蛋白质免疫印迹法(Western Blot)的效率，比较凝胶中每孔的蛋白上样量。此类对照可帮助确定样品间表达水平的差异，以判断是由细胞裂解物的实际蛋白水平导致，还是由上样量的差异导致。
内参抗体在目标蛋白的免疫荧光研究中，也可以作为共染的阳性对照。内参抗体分为未标记型和标记型，标记物包括生物素、HRP、FITC、PE、Cy染料和Alexa Fluor染料。
内参抗体种类很多，比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Vinculin、Lamin B、PCNA等，其选择常使我们困惑。本文将简单介绍选择内参抗体应遵循的五项原则：
一、样本种属来源：
首先要考虑实验样本来源于什么物种。
1. 哺乳动物的组织或者细胞样本，通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,Katpase等。
2. 植物来源实验样本，则可以选择plant actin、Rubisco等。
3. 其他来源样本研究较少，所以就应该参照文献报导，选择合适的蛋白作为内参。
二、分子量大?。?/span>
选择内参抗体时，应该考虑目的蛋白分子量的大小，一般保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD以上。例如，目的蛋白分子量为40KD，此时不适宜选择β-actin、与GAPDH作为内参，可以考虑选择α-Tubulin或者β-tubulin作为内参。三、表达水平：
选择的内参蛋白需要在待测样本中是高表达的。常用的内参蛋白是由管家基因高表达的，是细胞发育和维持细胞活力所必须的。例如，细胞核的内参蛋白 PCNA，在 DNA S 期表达，因此对于非增殖细胞不推荐使用。四、目的蛋白表达定位：
| 适用范围 | 名称 | 货号 | 分子量 |
|
胞质 |
beta I Tubulin | bsm-33041M | 50kDa |
| beta Tubulin | bsm-33034M | 50kDa | |
| bs-4511R | 50kDa | ||
| beta Actin | bsm-33036M | 42kDa | |
| bs-0061R | 42kDa | ||
| GAPDH | bs-10900R | 36kDa | |
| bs-2188R | 36kDa | ||
| bsm-0978M | 36kDa | ||
| bsm-33033M | 36kDa | ||
|
alpha Tubunlin |
bs-20496R | 50kDa | |
| bs-0159R | 50kDa | ||
| Vinculin | bsm-54148R | 117kDa | |
| Cyclophilin B | bsm-33228M | 20kDa | |
| bsm-52473R | 20kDa | ||
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核蛋白 |
Histone H3 | bs-0349R | 15-17kDa |
| bsm-33042M | 15-17kDa | ||
| Lamin B | bs-23709R | 66-72kDa | |
| bsm-33040M | 66-72kDa | ||
| PCNA | bs-0754R | 36kDa | |
| bsm-52347R | 36kDa | ||
| bsm-33035M | 36kDa | ||
| TATA binding protein TBP/TBP | bsm-33227M | 38kDa | |
| YY1 | bsm-52349R | 46kDa | |
| HDAC1 | bs-1414R | 65kDa | |
| bsm-52080R | 65kDa | ||
|
膜蛋白 |
ATPase Na+/ K+ beta 2 (ATPB2) | bs-1152R | 33kDa |
| bs-23414R | 33kDa | ||
|
质膜 |
ATP1A1 (Sodium Potassium ATPase) | bs-4255R | 97-110kDa |
| bsm-52485R | 97-110kDa | ||
|
线粒体 |
COX4 | bsm-33037M | 17kDa |
| VDAC1 | bs-1461R | 32kDa | |
| bsm-52251R | 32kDa | ||
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全血/血浆/血清 |
Transferrin | bsm-33243M | 77kDa |
| bs-2052R | 77kDa | ||
| Albumin | bsm-0945M | 66kDa | |
| bs-0945R | 66kDa | ||
|
细胞增殖标志物 |
BrdU | bsm-0917M | 化合物 |
| bs-0489R | 化合物 | ||
| 植物内参 | Plant actin | bsm-33128M | 42kDa |
五、表达因素：
选择蛋白表达不受实验变量影响的内参。
●在做多组织多细胞样本对比表达量时，最好选用 GAPDH作为内参，因为GAPDH是代谢类蛋白，在活组织中表达比较恒定。而β-Actin和β-Tubulin是结构蛋白，不同组织的细胞结构会有差异性；
●而在某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高，不适合做内参；
●涉及细胞增殖的相关试验中，c-Jun由于自身表达变化不适合做内参；
●凋亡实验时，TBP、Lamin等也不适合作为内参；
●做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时，应选择结构蛋白作为内参，如β-Actin 和β-Tubulin；
●做各种分泌液样本的时候，如血浆、乳汁、组织液等，由于没有完整的细胞结构，只能选择一些分泌蛋白作为内参。
内参抗体验证示例
